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细胞生物实验

1 细胞生物学基础 1.1 细胞结构和功能 1.2 细胞周期和分裂 1.3 细胞信号转导 2 细胞生物学实验设计与实施 2.1 细胞生物学实验设计原则 2.2 细胞生物学实验材料准备 2.3 细胞生物学实验设备操作 2.4 细胞生物学数据采集与分析 3 常见细胞生物实验 3.1 显微镜观察实验 3.1.1 普通光学显微镜观察 3.1.2 荧光显微镜观察 3.1.3 共聚焦显微镜观察 3.2 细胞培养实验 3.2.1 细胞培养实验之原代细胞培养 3.2.2 细胞培养实验之细胞系培养 3.2.3 细胞培养实验之无血清培养 3.3 细胞活力与毒性检测实验 3.3.1 MTT法 3.3.2 CCK-8法 3.3.3 琼脂糖平板克隆形成实验 3.4 细胞迁移与侵袭实验 3.4.1 细胞划痕实验 3.4.2 Boyden小室实验 3.5 细胞凋亡实验 3.5.1 Hoechst染色法 3.5.2 TUNEL法 3.6 细胞周期分析实验 3.6.1 PI染色流式细胞术 3.6.2 BrdU掺入实验 3.7 蛋白质表达水平检测实验 3.7.1 免疫荧光染色 3.7.2 ELISA 3.8 基因表达水平检测实验 3.8.1 RT-PCR 3.8.2 qRT-PCR 3.8.3 RNA-seq 3.9 细胞信号通路研究实验 3.9.1 细胞信号通路研究之抑制剂处理 3.9.2 细胞信号通路研究之免疫共沉淀 3.9.3 CHIP-qPCR 4 细胞实验报告撰写 4.1 细胞生物学实验目的和原理 4.2 细胞生物学实验材料和方法 4.3 细胞生物学实验结果和分析 4.4 细胞生物学实验结论和讨论
首页 教程 细胞生物实验 TUNEL法
TUNEL法,全称Terminal deoxynucleotidyl Transferase dUTP Nick End Labeling,是一种用于检测细胞凋亡的技术。其基本原理是利用脱氧核糖核酸末端转移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase,TdT)催化荧光素或生物素标记的dUTP与DNA断裂产生的3'-OH末端连接,形成新的DNA片段,然后通过荧光显微镜或流式细胞仪等方法进行检测。 具体步骤如下: 1. 制备样本:首先需要将待检测的组织或细胞固定在载玻片上,并进行一系列的预处理,包括脱钙、脱脂、水化等。 2. 酶反应:将处理好的样本放入含有TdT和荧光素或生物素标记的dUTP的反应液中,进行酶反应。在这个过程中,TdT会催化dUTP与DNA断裂产生的3'-OH末端连接,形成新的DNA片段。 3. 洗涤:酶反应完成后,需要用洗涤液将未结合的dUTP和TdT洗掉。 4. 检测:最后,可以通过荧光显微镜或流式细胞仪等方法进行检测。如果样本中的细胞发生了凋亡,那么就会在细胞核中看到明亮的荧光信号。 TUNEL法的优点是灵敏度高,特异性强,可以定量分析细胞凋亡的程度。但是,它不能区分细胞凋亡和坏死,也不能确定细胞凋亡的具体原因。

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